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月旭科技牛奶中甲砜霉素測定解決方案

更新時間:2018-09-14 點擊次數(shù):2111

牛奶是我們?nèi)粘I钪惺殖R姷囊环N飲料,其營養(yǎng)豐富,能夠補(bǔ)充人體日常所需的蛋白質(zhì),補(bǔ)充鈣質(zhì)等等。牛奶還是非常棒的早餐飲品之一,同時晚上睡覺之前喝一杯溫?zé)崃说呐D?,還具有安神的效果,能美美的香香的睡上一覺。


而牛奶中會含有一種甲砜霉素,為白色到類白色結(jié)晶性粉末或晶體。甲砜毒素在臨床上主要用于治療呼吸、泌尿、肝膽、傷寒等腸道外科、婦產(chǎn)科和五官科感染等癥,特別對中輕度感染作用尤其明顯。


服用甲砜霉素可發(fā)生腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等消化道反應(yīng),其發(fā)生率在10%以下。本品亦可引起造血系統(tǒng)的毒性反應(yīng),主要表現(xiàn)為可逆性的紅細(xì)胞生成抑制,白細(xì)胞和血小板減少等。
因此通過有效的實驗技術(shù)手段,對牛奶中的有關(guān)甲砜霉素殘留進(jìn)行監(jiān)控,以確保消費者對牛奶消費的安全具有重要意義。


適用范圍
適用于牛奶中甲砜霉素殘留量的檢測。

溶液的配置
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1mg/ml):稱取甲砜霉素對照品(15318-45-3)10mg,置于10ml容量瓶中,用乙腈定容至刻度。儲藏條件2-8℃,保質(zhì)期一個月。
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液(100μg/ml):量取1mg/ml甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0ml至10ml容量瓶中,用流動相稀釋至刻度。
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液(10μg/ml):量取1mg/ml甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0ml至100ml容量瓶中,用流動相稀釋至刻度。

提取步驟
純牛奶:稱取試樣5g至50ml離心管中,加乙酸乙酯20ml,渦旋混勻2min,8000r/min離心5min,將上清液轉(zhuǎn)移至100ml雞心瓶中;再次重復(fù)上述提取步驟兩次。合并三次提取液,于45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干;雞心瓶中殘液加入5ml水,超聲5min使之充分溶解,再向雞心瓶中加入10ml正己烷,一并轉(zhuǎn)移至50ml離心管中;再加5ml水與10ml正己烷于雞心瓶中重復(fù)溶解后轉(zhuǎn)至同一離心管中,渦旋混勻2min,4000r/min離心2min,取下層清夜待凈化。

SPE凈化步驟

活化:5mL乙腈,5mL水,棄去
上樣:待凈化液全部上樣,棄去
淋洗:2mL水(潤洗離心管),棄去,抽干
洗脫:10mL乙腈,收集于15ml離心管中,氮吹吹干,用流動相定容至1mL,并過0.45 μm濾膜,上HPLC檢測


色譜條件
色譜柱:月旭Ultimate®XB-C18(4.6 x 250mm, 5μm)
流動相:水/乙腈=(4/1)
流速:1.0mL/min
柱溫:30℃
進(jìn)樣量:20μL
檢測波長:225nm


色譜圖及加標(biāo)回收率結(jié)果

圖1.甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)品500μg/L譜圖

 

圖2.牛奶樣品加標(biāo)2.0mg/kg譜圖(SPE柱:BRP)

表1:牛奶樣品BRP小柱處理加標(biāo)回收率

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